血常规分析仪已经成为血常规检验必用的实验手段,特别是具有五分类能力的血细胞分析仪, 目前已经非常广泛的应用,不仅大大提高了临床血液学检验的质量和效率, ,而且基本能够满足临床诊断及实验要求.但是由于血细胞分析仪依然具有部分设计缺陷,并不能在一些检测项目上给出非常确切地结果,甚至导致检测错误或漏检,仍不能完全取代人工镜检,因此制定严格的复检规则非常必要.国际上已经有41条复检规则推荐,涉及到红细胞,白细胞,血小板及网织红细胞的具体筛检内容,而各医院根据自身情况也制定相应的复检规则,这是一种非常严谨的做法,其目的是减少漏检与差错的发生,尽量降低假阳性率,避免出现假阴性.
近日,在我们科就出现了这么一例白细胞假性升高的案例。
某日凌晨,对于正在上夜班的笔者来说身体已经疲惫不堪,但仍然聚精会神的审核着刚送过来的一批血常规的结果,丝毫不敢有所懈怠,想到一会就下夜班,不由得加快了进度,这时一个结果引起了笔者的注意,白细胞未分类,这种情况以前也有发生,结果见图1左
图1：LH750和BC-5800测定结果图
笔者首先仔细检查血液标本,未发现量少、有凝块及其他异常,然后拿标本到另一台血细胞分析仪上复查,在5800上复查结果出来后,结果让笔者感到困惑,结果见图1右，主要项目HGB﹑RBC﹑PLT相差不大，但白细胞数值4.6与之前1.8相差还是挺大,这又是怎么回事呢？于是笔者首先检查了下两台仪器的室内质控,近期都挺好的,又查看了下病人的情况,庾某,女,24岁,临床诊断为MDS(骨髓异常增生综合症),然后回顾了两台仪器的直方图与散点图,见图1右和图2
图2：LH750测定结果直方图与散点图
BC-5800提示有未成熟细胞,LH750提示有细胞干扰及散点图显示有核红细胞增多，看到这儿，笔者想到难道是有核红细胞干扰白细胞的测定值？于是决定镜检观察,看是否真如所想的一样，经过一段时间的推片染色后,迫不及待的在镜下观察,结果镜下果然发现很多有核红细胞,见图3
图3：镜下可见有核红细胞
笔者搞明白了是有核红细胞影响了白细胞的计数分类，然后手工计数有核红细胞，根据校准公式WBC数=仪器计数结果×〔100/(100+NRBC)〕纠正白细胞测定值，纠正后白细胞值也基本符合第一次在贝克曼库尔特LH750上的检测结果。
首先我们了解下LH750白细胞计数分类的原理： LH750血液分析仪进行白细胞分类采用VCS技术，是从体积、核质比、颗粒特性、膜特性和形态等方面对白细胞综合分析。在分类中涉及两种试剂，一种是五分类溶血素，另一种是稳定剂。稀释液作为鞘液。当全血进入混匀池时，五分类溶血素首先将血细胞胀大，并破坏溶解红细胞和血小板,这时稳定剂注入混匀池，使白细胞恢复到原态，混匀后的样品在样品压力与鞘流的作用下，在流式通道内作单细胞排列，进行VCS三种参数的同时检测(19秒检测8192个白细胞)，然后统计分析得出白细胞分类结果.
而迈瑞BC-5800原理是采用激光流式细胞技术,当一定量的血细胞被吸入并经过特定量的试剂作用后，血样经喷嘴注入充满稀释液的圆锥形流动室中，在稀释液形成的鞘液包裹下，细胞单个排列成行地穿过流动室的中央。当悬浮在鞘液中的血细胞经过二次加速后通过激光检测区时，血细胞受到激光束的照射，产生的散射光性质与细胞的大小﹑细胞膜和细胞内部结构的折射率有关。低角前向散射光反映了细胞的大小，高角前向散射光则反映细胞的内部精细结构和颗粒物质，根据这些数据分析得出白细胞的分类。
可以看出两者在细胞计数上原理相差不大，但是为什么这次WBC测定结果会相差挺大呢？我们回过头看图2右，散点图显示大量有核红细胞，说明是有核红细胞影响了白细胞的计数，根据白细胞计数原理，两者都是用溶血剂将红细胞溶解破坏后计数白细胞，但是有核红细胞只能溶解细胞膜而不能破坏细胞核，因此这些有核红细胞会被误认为是淋巴细胞而计入白细胞数中，从而影响白细胞计数，使白细胞测定值假性增高，而从图2左白细胞直方图也能看出淋巴细胞增多。虽然搞清楚了白细胞计数为什么增高，但是为什么LH750白细胞计数不高且符合手工镜检计数呢？这是因为贝克曼库尔特LH750有白细胞计数自动纠正功能，当血液中存在巨大血小板、血小板凝集、有核红细胞、难溶红细胞等非白细胞颗粒时，由于颗粒大小在白细胞计数区域，所以会被误认为白细胞而计数在内，直方图显示与Y轴有个很高的截距，提示在35fl左右计数受到干扰，对此CoulterLH750血液分析仪在白细胞计数35fl起始处设有阈值监控，若白细胞在35fl处的数量超过该阈值，则会触发报警，仪器采用智能微数技术，通过复杂的算法自动纠正计数值，并报告纠正值。不管白细胞结果是否被纠正，在血细胞参数栏患者结果中，每份标本均可看到白细胞结果与对应的未纠正值，如图2左。
血常规分析仪虽然可以极大的提高我们的工作效率，但仍然会因为部分设计缺陷而导致结果有偏差，所以在日常工作中，对于那些特殊疾病或特殊标本的结果审核要倍加小心，必须结合直方图与散点图，提示有异常时仍然需要我们去镜检，所以，镜检是很重要的质量控制，是避免医疗纠纷，减少差错的重要措施，提高检验水品，对病人负责，做一名合格的检验人员。