一、什么手性
许多药物中存在着分子组成与构造完全相同但分子的立体结构不同的化合物，他们是立体异构体，不能完全叠合但能互为镜像，（如左手与右手），这就是手性(chirality)。
二、手性药物
药物作用的靶分子都是手性的，因此药物分子与靶分子的不对称性必须相匹配（手性识别－手与手套）。
另外，分子药理学研究发现，含有手性因素的化学药物对映体，在人体内的药理活性、代谢过程和毒性存在着显著差异。在通常情况下，只有一个对映体具有药理作用，而另一个对映体不仅无药理作用，还会产生一定副作用。
如20世纪60年代，镇静药反应停（thalidomide,沙利度胺）的消旋体用作缓解妊辰反应作用，后来发现在欧洲服用过的孕妇不少产下海豚状畸形儿。随后研究表明：反应停右旋体（R型）有镇静作用，左旋体（S型)具有胚胎毒性和致畸作用。
三、常用的手性药物测定技术
高效液相色谱(HPLC)
气相色谱(GC)(样品需具有一定的挥发性及热稳定性）
毛细管电泳(HPCE)
超临界流体色谱（SFC)
1、HPLC
80年代初HPLC法迅速成为药物对映体分离和测定最为广泛应用的方法。
特别适用于极性强、热稳定性差的手性药物的分析。
HPLC用于手性分离概括起来可分为两大途径：间接(CDR)和直接(CMPA、CSP)方法。
2、液相色谱法分离手性药物
直接法（CMPA、CSP）：
对映体之一与手性固定相或手性流动相添加剂间发生分子间的三点作用（较稳定），另一对映体发生两点作用；形成暂时的非对映异构体的结合物质，通过洗脱分离。
间接法（CDR)
又称为非对映体拆分法或柱前手性衍生化法
对映体混合物在预处理中进行柱前衍生组成一对非对映体(Diastereoisomers)，依其理化性质的差异，在非手性柱上得以分离。
（1）间接法：柱前衍生
优点：
*可采用通用的非手性柱分离；
*通过衍生化可提高检测灵敏度；
*分离条件简单；
*分离效果好
缺点：
*要有可被衍生化的基团；
*要有高光学纯度的手性试剂；
*对个对映体衍生化率速和平衡常数应一致；
*衍生化和色谱过程中不能发生消旋化；
（2）直接法
手性流动相添加剂（CMPA）法：（又可称为手性流动相(CMP)拆分法或手性洗脱法）
*环糊精(Cyclodextrins)类（主要是α-、β-和γ-环糊精及其衍生物）；
*手性离子对配合剂(ChiralIon Pair Complex,CIPC)，如（+）-10-樟脑磺酸、奎宁和奎尼丁等；
*配位体交换型手性流动相添加剂（ChiralLigand-exchange Complexs, CLEC) 。
手性固定相（CSP）法
（3）手性固定相（CSP）法
优点是：
*能广泛适用于各类化合物，适于常规及生物样品的分析测定；；
*除非必须衍生化，否则无需高光学纯度试剂；
*样品处理步骤简单。
*制备分离方便，定量分析的可靠性较高；
缺点是：
*样品有时也须作柱前衍生（但不一定是手性衍生化试剂），
*对样品结构有一定限制，其适用性尚不及普通HPLC固定相（包括正相和反相）那样广泛。
*迄今为止，CSP柱商品已有40多种，价格大多昂贵，尚未有一种具有类似ODS柱的普遍适用性。
（4）常用的手性固定相（CSP）法
*刷（Brush）型或称为Prikle型
*手性聚合物固定相（如纤维素、淀粉，合成的手性聚合物）；
*含肽或蛋白质手性固定相；
*含环糊精（Cyclodextrin）及其衍生物的手性固定相；
*大环抗生素（Macrocyclicantibiotics）型
*配位交换（|Ligand exchange）型
*冠醚（Crownethers）型
四、合适的CSP柱
在手性拆分中，温度的影响是很显著的。低温增加手性识别能力，但可能引起色谱峰变宽而导致分离变差。因此确定手性分析方法过程中要考虑柱温的影响，确定最优柱温。
根据分子结构选择合适的CSP柱是非常重要的。
ChiralTechnologies Europe(法国)和ChiralTechnologies(美国，是日本Daicel化学工业公司的全资子公司)是专门为制药和农业化学及相关工业提供对映体分离服务的公司。服务的领域包括分析方法的开发和cGMP吨级单一对映体的分离和商业规模工艺的开发等。
手性聚合物固定相商品柱主要是日本Daicel公司制造的Chiralcel柱。
Daicel固定相的广泛选择性和高负载性能，使ChiralTechnologies及整个Daicel集团成为手性色谱产品和服务市场的领先者。Daicel的手性固定相是以纤维素为基础的，如将甲酰(3，5-二甲苯胺)基引入纤维素的羟基。
1、手性聚合物固定相Chiralcel柱类型与应用
2、DAICEL 柱使用的溶剂
流动相采用烷烃-醇混合物体系（主要是正己烷-异丙醇），极性溶剂乙醇、甲醇、乙腈容许存在。
以下溶剂一点也不可以存在（会破坏柱子）：
丙酮、氯仿、DMF、DMSO、THF、甲苯、乙酸乙酯、二氯甲烷、吡啶
3、经验
CHIRALPAK AD-H
>CHIRALCEL OD-H(50-60%)
>CHIRALCEL OJ-H # CHIRALPAK AS-H
(20%)
五、其他注意事项
1、流动相添加剂
酸性化合物：TFA>乙酸、甲酸
碱性化合物：DEA>乙醇胺、丁醇胺
加入量0.1％-0.2％，不超过0.5％。
柱子稳定的PH范围：2.0-7.0。
2、样品溶解性
样品含量0.5mg/ml—1.0mg/ml.
酸性化合物和碱性盐，可加添加剂来增加样品的溶解性。
仍不好溶，可溶于100％醇（甲醇、乙醇、异丙醇）;若流动相中有烷烃则不可用乙腈.
水溶性化合物最好用反相柱，如OD-R、OD-RH、OJ-RH、AD-RH、AS-RH; 可用醇-水、乙腈-水作流动相。
3、柱子压力过高
原因：可能是杂质堵住了柱头（frit）。
可更换在线过滤器（in-linefilter)或保护柱，或注射前过滤样品。
由于乙醇、异丙醇粘度大，正常流速下可能会导致压力过高。可降低流速直至达到容许的上限。
4、保护柱
保护分析或半制备柱子免受易于在固定相上吸附或溶化填料的物质的损坏。
保护柱材料与柱子相同。
以下情况需要更换保护柱：
*失去分离作用；
*峰宽增加；
*脱尾；
*增加体系压力降