陈王露1 詹星星2 孙志勇1
1.浙江惠迪森药业有限公司
浙江杭州 311400；
2.海正辉瑞制药有限公司
浙江 杭州 311400
摘 要：以冻干粉针剂生产工艺为例，从人员、胶塞/西林瓶、产品自身、环境和设备、工艺流程设计方面，阐述了冻干粉针剂生产中可见异物的来源，并提出了相应的控制措施。
关键词：注射剂；可见异物；来源；控制措施；工艺流程
0 引言
注射剂的可见异物是无菌注射剂药品生产过程中需要进行控制的关键参数。在2015版《中国药典》注射剂通则中明确规定了可见异物是注射剂产品必须进行检测的项目。注射剂中的可见异物种类很多，如橡胶屑、炭黑、碳酸钙、氧化锌、纤维、纸屑、黏土、玻璃屑等，这些物质一旦进入人体，通过血液循环系统会造成血管栓塞，或粘附于组织中形成病变，如滤纸纤维进入兔、狗体内可产生肺肉芽肿。橡胶屑、玻璃屑进入人体不但会引起血管肉芽肿，还会引起肺泡变厚、肺动脉瓣闭锁不全，甚至引起纤维性病变[1]。用于降低注射剂生产过程中产生可见异物的风险控制措施，应贯穿于起始物料、生产过程、中间控制以及最终检测的全过程。
注射剂种类包括注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液[2]。根据工艺不同，注射用无菌粉末又分为冻干粉针剂和无菌粉针剂。从生产工艺流程来看，冻干粉针剂产生可见异物的风险是最高的。因此，本文以冻干粉针剂生产工艺为例，分析产生可见异物的来源，并提出相应的控制措施。
1 冻干粉针剂的生产工艺流程
冻干粉针剂的基本生产工艺流程：配液→无菌过滤→灌装→冻干→轧盖→灯检→外包。此外，还包括西林瓶清洗、灭菌与干燥，胶塞清洗、灭菌与干燥以及铝盖的处理等。
产生可见异物风险的工艺关键点有：配液、无菌过滤、灌装、冻干，还包括西林瓶清洗、灭菌与干燥，胶塞清洗、灭菌与干燥。由于轧盖后的产品处于密封状态，所以基本不会产生外源性的可见异物。
2 可见异物的来源分析及控制措施
可见异物的来源一般可以采用鱼骨图进行分析，从人、机、料、法、环五个方面，找出所有可能导致可见异物控制失败的影响因素。
2.1 人员
人员必须遵循无菌产品生产的洁净室行为规范。人员一般需要在总更间将自己易脱落纤维的毛衣、外套更换成车间专用的洁净服，洁净服适合分体方式，以减少员工自身的颗粒脱落对环境造成的影响。
人员在进入洁净区更衣时，适合采用只穿不脱的方式，减少衣物的穿脱次数，防止颗粒的增多。
人员在关键的无菌区域操作时，需要减小动作幅度，不允许快走、跷二郎腿、大声说话等，否则容易造成产品颗粒增多。
2.2 胶塞/西林瓶
物料的影响包括内包材、与产品接触的器具、容器、间接接触的耗材、药液本身的异物控制水平等。其中，与产品直接接触的内包材一般包括胶塞、西林瓶。
2.2.1 胶塞
胶塞一般通过清洗灭菌干燥，再密闭转运至无菌灌装区域。目前胶塞清洗灭菌干燥后的转运方式有多种：如，通过全自动胶塞清洗机（三合一设备）进行胶塞的清洗灭菌干燥的，需要通过无菌PE袋进行包装转运，这种方式需要确保PE袋的可见异物控制水平满足要求。又如，有些企业是直接采购免洗的胶塞进行灭菌后直接使用，胶塞使用呼吸袋包装。
免洗胶塞在胶塞的供应商审计时，需更加关注供应商胶塞清洗的程序、介质、环境、关键参数的控制和监测方式。在使用免洗胶塞时也需要注意，开口的面应该是非呼吸材质面，呼吸材质面在剪开时容易脱落纤维；对PE袋而言，对包装用PE袋的供应商资质、生产工艺、最后一步处理的环境都需要进行评审。
2.2.2 西林瓶
西林瓶的可见异物来源主要包括清洗不彻底以及在隧道式灭菌烘箱中引入外源性异物。
西林瓶的清洗一般经过超声清洗、循环水清洗、终端注射用水清洗，再加上洁净压缩空气的内外气洗。其中，一般循环管路出来的终端注射用水的可见异物不会存在大的问题，但需要注意过滤器的污染情况，包括储罐呼吸器长时间和高温、潮湿的空气接触后，过滤器材质出现脱落，导致整个循环水系统出现可见异物的污染，注射用水的终端过滤器、循环水的过滤器以及洁净压缩空气的终端过滤器也存在同样的问题。因此，企业需根据滤芯厂家的建议和自身经过验证的滤芯使用时间，来确认滤芯的更换周期。
西林瓶清洗后经隧道式灭菌烘箱进行灭菌干燥时也存在被污染的可能，隧道式灭菌烘箱长期运行在高温环境中，需要选择耐高温的过滤器，需要定期监测隧道灭菌烘箱环境的洁净级别。同时，高效过滤器在进行定期检漏的时候，需要尽量减少PAO检测所用气溶胶的残留。
2.3 产品自身
产品本身也可能带入可见异物，一般冻干粉针剂生产时，配液后通过两级无菌过滤器进入灌装工序。对于配液后药液可见异物控制要求较高的产品，可能还会增加一个预过滤器进行颗粒物质的过滤。在过滤纤维、颗粒前，需要彻底清洗预过滤器[3]。
此外，有些可见异物来自于原料药自身。比如，原料药为发酵型产品，在提取纯化过程中出现异常情况，导致大分子的蛋白残留，但是在配液和过滤阶段都处于溶解状态，过滤器并不能拦截这类异物，当出现振荡、压力、摩擦等诱发因素后，蛋白絮凝形成可见异物。这类可见异物为内源性可见异物，需要对供应商进行严格的审计。
2.4 环境和设备
冻干粉针剂属非最终灭菌产品，保证无菌生产操作的洁净级别是保障产品可见异物控制符合要求的关键。按照法规，冻干粉针剂的灌装环境为（B+A）级，表1为各级别空气悬浮粒子[4］。
根据我国GMP附录1无菌药品第九条规定：无菌药品生产所需的洁净区分为4个级别。其中，A级为高风险操作区，如灌装区、放置胶塞桶和与无菌制剂直接接触的敞口包装容器的区域及无菌装配或连接操作的区域，应当用单向流操作台（罩）维持该区的环境状态。单向流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36～0.54 m/s（指导值），应当有数据证明单向流的状态并经过验证。同时，在密闭的隔离操作器或手套箱内，可使用较低的风速。
在关键生产操作过程中，包括设备组装操作，应当对A级洁净区进行悬浮粒子监测。生产过程中的污染（如活生物、放射危害）可能损坏尘埃粒子计数器，应当在设备调试操作和模拟操作期间进行测试。
A级洁净区一般采用在线粒子监测方法进行环境检测，采样结果会实时报警，也可以和灌装设备联动，当监测数值超过警戒线时，灌装机就会联动停机，以警示环境可能不符合A级要求，需要立即停机进行纠正。
一般通过安装、调试、验证合格的空调系统来保障环境的洁净度。悬浮粒子的控制主要依赖于终端高效过滤器的截留能力，一般高效过滤器安装后需要进行定期检测，确保高效过滤器不存在泄漏情况。一般情况下，A级洁净区的H13或者H14过滤器每半年进行一次检漏监测。一旦发现泄漏，应该进行偏差调查处理，对泄漏的影响进行评估，一般可以通过环境监测的数据来评估其对产品的影响程度。
正常生产期间，洁净环境需要定期进行清洁消毒，包括常规的生产结束的清洁消毒、定期的非常规消毒和洁净环境破坏后的非常规消毒，一般至少采用两种以上的消毒剂进行轮换消毒。用有残留的消毒剂消毒后，需要用无残留的消毒剂或者清洗用水进行消毒或清洗，防止残留物对产品和设备设施造成影响。
2.5 工艺流程设计
在涉及人/物流操作方面，应尽量减少不必要的重复动作。流程设计精简，避免人/物流通道内人员过多的走动，以防产尘过大。同时，清场流程设计时，需要注意交叉污染，从高级别到低级别进行清洁和消毒。
3 结语
药品的质量源于设计，冻干粉针剂的关键质量属性——可见异物，应在厂房、设备、程序设计前期进行考虑。
可见异物的在线检测技术目前有了很大的突破和进展。对于注射液的可见异物检查采用全自动灯检机，其基本原理是应用SD检测方法检查可见异物，将装有药品的玻璃瓶高速旋转，用制动器使玻璃瓶迅速停止旋转，玻璃瓶内的药液由于惯性还保持原来的运行状态，药液内的可见异物也随着一起运动，通过激光透镜，将异物的影子准确无误地投射到DA传感器上，引起电压的改变，进而判断是否存在可见异物，判断的可见异物包括玻璃屑、白块、纤维[5]。但是，冻干粉针剂不能采用上述的灯检原理进行检测，因为冻干粉针剂的内容物是粉针或者块状，旋转后粉针容易粘附于玻璃瓶表面，更加影响检测系统的判断。目前，虽然开发了X射线照射技术，但是检测速度、射线污染、人员防护等方面仍然存在尚未解决的问题。希望各界同仁继续开发和完善X射线照射技术，为实现粉针剂可见异物的在线监测提供技术支持。
[参考文献]
[1] 韩金华，孟庆强，辛文燕.小容量注射剂市场抽验可见异物不合格的原因及对策[J].中国药业，2008，17（18）：9-10.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015.
[3] 邢军.可见异物检查法有关问题的探讨[J].中国药事，2008，22（6）：472-473.
[4] 药品生产质量管理规范（2010年修订）：卫生部令第79号[A].
[5] 朱明岩，凌娅，范庆龙，等.国内外全自动异物灯检机性能比较研究[J].机电信息，2014（35）：15-19.
作者简介：
陈王露（1987—），女，浙江杭州人，助理工程师
研究方向：
药品无菌制剂