色谱过程和色谱流出曲线
二、色谱流出曲线
相关概念了解即可。（基线、色谱峰、峰高、标准差、半峰宽、峰宽、峰面积），需要掌握的几点：
1.一个组分的色谱峰可用三项参数即峰高或峰面积（用于定量）、峰位（用保留值表示，用于定性）及峰宽（用于衡量柱效）说明。
2.对于正常峰，标准差为0.607倍峰高处的峰宽之半。
3.半峰宽：掌握公式17-1
4.峰宽：掌握公式17-2（峰宽不等于2倍半峰宽）
一、相平衡参数
1.分配系数（K）：是在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相（s）和流动相（m）中的浓度（c）之比。（掌握公式17-4）
2.保留因子（k）：是在一定温度和压力下，达到分配平衡时，组分在固定相（s）和流动相（m）中的质量（m）之比。（掌握公式17-5）
3.分配系数和保留因子的关系（掌握公式17-6）
二、保留值
1.保留时间（tR）：是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔。
保留时间受哪些因素影响？
1)增加固定液的用量，tR 增加 2)增加柱温，传导速度加快，tR 减小 3)增加流速，洗脱速度增加，tR 减小 4)柱长改变 （L改变→n改变→tR改变）
2.死时间(t0)：是分配系数为零的组分即不被固定相吸附或溶解的组分的保留时间。
3.调整保留时间(tR’）: tR’= tR- t0
tR’是其在固定相中滞留的时间。
4.保留体积（VR）：是从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大时，所需通过色谱柱的流动相体积。VR 与流动相流速无关。
5.死体积（V0）：是由进样器至检测器的流路中为被固定相占有的空间的容积。分配系数为0的物质的保留体积为V0，近似等于填料孔隙的体积即V。
6.调整保留体积（VR’）：保留体积-死体积（VR- V0），VR’与流动相流速无关。
7.相对保留值：两组分的调整保留值之比。
8.保留指数：是气相色谱法中定性的参数。以正构烷烃系列作为组分相对保留值的标准。
三、分离度（R）
分离度是相邻两组分色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。
掌握公式17-12（R=1.5，两峰完全分开。）
色谱法的基本原理
一、差速迁移
死时间t0近似于组分在流动相的时间tm。
掌握公式17-13和17-14（分配系数K大的组分容量因子k大，在色谱柱中不易被洗脱，tR与VR均大， Rf值小）
二、基本类型色谱法的分离机制
（一）分配色谱法
1.分离机制：分配色谱法利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别，即在两相间的分配系数的差别而实现分离。
2.固定相和流动相：流动相的极性弱于固定相的极性，称为正相分配色谱。流动相的极性强于固定相的极性，称为反相分配色谱。
3.洗脱顺序：正相液液分配色谱的洗脱顺序为极性弱的组分先被洗脱，极性强的组分后被洗脱。反相分配色谱的洗脱顺序与此相反，极性强的组分先出柱，极性弱的组分后出柱。
（二）吸附色谱法
1.分离机制：吸附色谱法利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的差别，即吸附系数的差别而实现分离。
2. 固定相和流动相
3.洗脱顺序：在色谱柱一定（Sa与Vm一定）时，Ka大的组分在吸附剂上保留强，后被洗脱；Ka小的组分在吸附剂上保留弱，先被洗脱。
（三）离子交换色谱法
分离机制：离子交换色谱法（IEC）利用被分离组分离子交换能力的差别，或选择性系数的差别而实现分离。
KA/B越大，说明A的交换能力大，越易保留。
（四）分子排阻色谱法
分离机制：是依据分子大小进行分离，流动相与色谱选择性无关。
相对分子质量越大，分子线团尺寸越大，Kp越小，先被洗脱下来。
色谱法的基本理论
一、塔板理论
塔板数（n）和塔板高度（H）为衡量柱效的指标。
塔板理论是在如下基本假设的前提下提出来的：1)在色谱柱内一小段长度即一个塔板高度H内，组分可以在两相中瞬间达到分配平衡2)分配系数在各塔板内是常数3)流动相不是连续的而是间歇的进入色谱柱，且每次只进入一个塔板体积4)试样在柱内的纵向扩散可以忽略。
（一）质量分配和转移
（二）色谱流出曲线方程
（三）塔板数和塔板高度
掌握公式17-26、17-27、17-28
二、速率理论
（一）塔板高度的统计学意义（了解）
（二）速率理论方程
速率理论方程，又称范第姆特方程或范式方程，其简化方程式为：H=A+B/u+Cu
H为塔板高度（cm）;A、B及C为三个常数，分别代表涡流扩散系数、纵向扩散系数和传质阻抗系数，其单位分别为cm、cm2/s及s;u为流动相的线速度（cm/s）。
影响柱效的动力学因素（此处内容很重要，将在后面详细介绍）
1.涡流扩散：A=2入dp (入-填充不规则因子，dp固定相的平均粒径）
2.纵向扩散:B=2yDm
3.传质阻抗
流动相线速度对柱效的影响：流动相线速度对涡流扩散无影响。在较低线速度时，纵向扩散项起主要作用；在较高线速度时，传质阻抗起主要作用。